ELISA試劑盒檢測成果剖析辦法

ELISA試劑盒細(xì)節(jié)決定成敗，這關(guān)于試驗室科研工作者來說也是如此。在ELISA試劑盒試驗中的各項操作細(xì)節(jié)有許多，如盡量少用排槍、勤換槍頭，加樣時由低濃度向高濃度加，由于這樣能夠削減跳孔的幾率。而整個試驗的zui后要害就是成果的處理辦法了，那么在在今日的技術(shù)文章中，我司為您帶來的是elisa試劑盒檢測成果剖析辦法。
①：ELISA試驗中樣品都要做復(fù)孔或三孔，然后計算每個濃度規(guī)范品的均勻OD值，復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。
②：均勻OD值減去空白孔的OD值。
③：制作規(guī)范曲線。
ELISA試劑盒以減去本底后的OD值為X軸，規(guī)范品的濃度為Y軸，運用作圖軟件得出一個適宜的計算辦法。主張運用適宜的軟件來作圖，比方CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出許多種辦法（比方直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參數(shù)方程等）并從中挑選一條zui適宜的方程。要想查驗?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)符合，能夠?qū)⒁?guī)范品的濃度作為未知數(shù)，將對應(yīng)的OD值帶入該方程，計算出規(guī)范品的濃度，得到的成果應(yīng)該與實際濃度很挨近（+/-10%）。挑選擬合度zui高的那條曲線。
ELISA試劑盒如果呈現(xiàn)規(guī)范曲線的線性欠好，或平行性欠好（雙孔對照孔的OD值不同很大），或呈現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象，可能引起的原因有酶標(biāo)板孔間彼此污染、洗板后未能趕快進(jìn)行下一步操作、增加樣品或其它試劑時操作的辦法不對、孵育方位避光性欠安或蓋板膜沒有密封好使得水分蒸騰、酶標(biāo)板孔問參加的試劑量不同，相對應(yīng)的解決辦法是加樣時請當(dāng)心勿將液體濺人另一孔中，人工洗板時也請當(dāng)心，勿將洗滌液濺人另一微孔中、在洗板后及時進(jìn)行下一步操作、增加試劑時請懸空滴入，牢記勿將槍頭接觸到板孔內(nèi)，汲取不同試劑瓶中的液體時就要替換一次槍頭、承認(rèn)孵育環(huán)境不透光，蓋板膜將酶標(biāo)板密封好、運用已校正過的微量加樣器，如將*次參加液體時槍頭上留有一滴的液體滴下，那么將今后槍頭上留有的液體也滴下，以確保參加液體體積的一致性。